CLED
CLED :
cystine lactose electrolyte deficient
Milieux d'isolement et de dénombrement non sélectif, non enrichie et différentiel vis à vis de l'utilisation de lactose. C'est un milieu solide convenant à la culture des bactéries ne présentant pas d'exigences particulière, milieu d'isolement différentiel par rapport au critères d'utilisation du lactose révélée par le virage en milieu acide de l'indicateur de pH.
L'absence d'électrolytes inhibe l'envahissement par Proteus.
Ce milieu est recommandé pour l'isolement et le dénombrement des germes urinaires.
COULEUR DU MILIEU AVANT ENSEMENCEMENT : BLEU-VERT
- Isolement : technique des quadrants
- Dénombrement à l'anse calibrée : l'anse utilisée est en plastique, stérile et à usage unique. Elle présente une boucle permettant de prélever un volume calibrée de 10 µl.
Après homogénéisation du prélèvement, prélever a l'aide de l'anse, une goutte d'échantillon puis réaliser une strie sur un rayon de la boîte de Pétri et ensuit des stries perpendiculaires au rayon avec l'anse.
- Incuber à 37°C pendant 18 à 24h.
Bio-gélytone......4.0
Bio-Trypcase......4.0
Extrait de viande de boeuf......3.0
Lactose......10.0
L-cystine......0.128
Bleu de bromothymol......0.020
Agar......15.0
pH = 7.3
OBSERVATION : Colonies entourés d'un halo jaune.
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INTERPRETATION : Présence d'un halo jaune : l'indicateur de pH à viré à sa teinte acide. IL y a donc utilisation du lactose par les bactéries.
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CONCLUSION : Les bactéries sont Lactose+
OBSERVATION : Colonie non entourés d'un halo jaune.
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INTERPRETATION : Pas de halo jaune : l'indicateur de pH n'à pas viré à sa teinte acide. Il n'y a donc pas eu utilisation du lactose par les bactéries.
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CONCLUSION : Les bactéries sont Lactose-
- Par étalement en surface (voir fiche)
-Par technique de l'anse calibrée : comparer la densité des colonies présentes sur CLED, dans la moitié supérieur, avec la séries de reproduction étalons cix-dessous :
T. 123-456-7890
